糖鎖修飾タンパク質の特性解析（LC-TOFMS）
LC-TOFMS（液体クロマトグラフ飛行時間型質量分析）法は、タンパク質の特性解析（分子量分析、ペプチドマップ、糖鎖分析など）に有用です。ここでは、LC-TOFMS法によるIgG抗体の糖鎖（グリコフォーム・糖鎖付加位置）の事例をご紹介します。
分析試料
- IgG抗体
分析方法
LC-TOFMS法により、IgG抗体を分析しました。
分析結果
グリコフォーム（糖鎖部分が異なるタンパク質）解析
分子量の分析により、糖タンパク質のグリコフォームを推定することができます。IgG抗体をLC-TOFMS測定し、分子量演算（デコンボリューション）処理により得られたMSスペクトルを図1に示します。その結果、このIgG抗体にはN結合型糖鎖であるG0F、G1F、G2Fが2つずつ5つの組み合わせで付加した5種のグリコフォームがあることがわかりました。
糖鎖結合位置解析
IgG抗体を酵素処理により断片化し、LC-TOFMS測定しました。測定結果について、専用のソフトウェアで解析した結果を図2に示します。解析の結果、アミノ酸配列EEQFNSTFRのペプチド断片のアスパラギン（N、図2左表の赤枠）にN結合型糖鎖（G0F,G1F,G2F）が付加していることが分かりました。
（上：検出された糖ペプチドリスト、下：MS/MSスペクトルおよび糖鎖構造の帰属例）
まとめ
LC-TOFMS法により、バイオ医薬品など、糖鎖修飾タンパク質の分子量、グリコフォームや糖鎖結合位置を確認できます。これらの特性を迅速・正確に分析することにより、バイオ医薬品の開発・品質確認を効率的に進めることができます。